Hanks 液的配制 Hanks 液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液 (Balanced Salt Solutio, ),简称H。主要用于配制配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞,组织培养液。
原液A: NaCl 160g MgSO4·7H2O 2g KCl 8g MgCl2·6H2O 2g CaCl2 2.8g溶于1000ml双蒸水
原液B:
(1) Na2HPO4·12H2O 3.04g KH2PO4 1.2g 葡萄糖 20.0g 溶于800ml双蒸水
(2) 0.4%酚红溶液:取酚红0.4g,置玻璃研钵中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直至完全溶解,约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗下研钵中残留酚红液,并入量瓶中,最后补加双蒸水至100ml
(1)液与(2)液混合,补加双蒸水至1000ml,即为原 液 B。
应用液:原液A 1份 原液B 1份 双蒸水18份
混合后,分装于200ml小瓶中,10磅高压蒸气灭菌15分钟,临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH至7.2~7.6
NaCL 8.00g KCL 0.40g CaCL2 0.14g MgSO4.7H20 0.20g Na2HP04.H2O 0.06g KH2PO4 0.06g NaHCO3 0.35g 葡萄糖 1.00g 酚红 0.02g 加水至1L,用NaHCO3调PH至7.2~7.4
甲液:Na2HPO4•2H2O 0.06克 KH2PO4 0.06克 MgSO4•7H2O 0.20克葡萄糖 1.00克 NaCl 8.00克三蒸水 750毫升
乙液:CaCl2 0.14克三蒸水 100毫升
①将乙液徐徐加入甲液中。②将0.35克NaHCO3溶解在37℃ 100毫升三蒸水中。③用数滴NaHCO3液溶解0.02克酚红。④将②、③液移入①液中。⑤用三蒸水定容至1000毫升,充分混匀,4℃冰箱过夜。⑥滤过消毒,小瓶分装,冷藏。
注意:酚红对细胞有一定毒性,目前实验中的用量除0.02克外,还有0.01克和0.005克,也有BSS液中不加酚红的。酚红量不同,BSS颜色也不同。
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